乙肝RNA干扰，相较反义分子及核酶，增加化学修

上一章小番健康介绍了靶向HBV的核酶新方法的可能性和局限性。RNA干扰（RNAi）用于对抗HBV感染，已被全球许多药企用于潜在新药研发。包括最早应用RNAi的药物ARC-520，也是使用这种方法。

乙肝RNA干扰，相较反义分子及核酶，增加化学修饰稳定性及特异性

RNAi是高度保守的序列，依赖性基因沉默途径，涉及调节广泛的细胞过程。RNAi机制是通过表达包括双链RNA发夹区的初级microRNA（pri-miRs）启动的。Pri-miR在由细胞内切核酸酶催化的连续核与胞质切割步骤中加工。Pri-miR最初由Drosha RNase III处理，该酶和双链RNA（dsRNA）结合伴侣Di George Critical Region 8（DGCR8）蛋白协同作用。

这能够产生前体miRs（pre-miRs），它被Dicer转运到细胞质中进行进一步切割，从而产生21-23 bp的成熟miR双链体。随后再把成熟的miRs掺入含有Argonaute 2（Ago2）的RNA诱导沉默复合物（RISC）中。选择一条链作为引导，其余的链随后从RISC降解或释放。引导链和靶mRNA杂交，以促进降解或翻译抑制。

RNAi途径，是利用选择性沉默基因工具，也被科学家认为是抗病毒基因疗法的备选方案之一。RNAi与上一章小番健康介绍的反义寡核苷酸、核酶等基因方法相比，从使用RNAi开发候选药物进入临床试验中，表现出RNAi药物更具有效性。RNAi介导的基因沉默，可以通过使用类似于miR双链体，pre-miR或pri-miR的合成或表达的RNA序列（RNAi激活剂）来实现。

通常科学家在合成激活剂时，会将其设计成为类似于miR双链体（短干扰RNA/siRNA），而表达的激活剂类似于pre-miR（短发夹RNA / shRNA和pre-miR模拟物）和pri-miR（pri-miR模拟物）。应用siRNA的主要优势有：更容易生产、剂量控制以及化学修饰用于增加稳定性、特异性、降低免疫刺激作用等。由于它们在细胞质中，起作用而且不需要核传递，所以，在与DNA表达盒相比时，这种方法更容易实现有效的细胞传递。

siRNA可以使用免疫原性较低的非病毒载体成功递送，并且脂质体递送系统也是最经常使用的。箭头制药公司最早使用RNAi方法开发的ARC-520，其临床前数据总体也带给科学界许多期待。ARC-520包含2个胆固醇缀合的siRNA和一个靶向肝细胞的膜溶解肽（NAG-MLP）。在其慢性HBV感染的黑猩猩模型中，2次注射后，ARC-520可令HBVDNA水平降低36倍，e抗原水平降低10倍，乙肝表面抗原水平降低80%。

包括ARC-520进入到人体临床试验中，其I期临床也表现出良好安全性与耐受性；在慢性HBV感染患者中的IIa期研究中，ARC-520也显示对表面抗原明显降低作用，且耐受性良好（临床试验编号：NCT0）（随后因相关传递毒性问题，该研究药物被终止）。

文章来源：《分子科学学报》 网址: http://www.fzkxxbzz.cn/zonghexinwen/2021/0421/865.html